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2013-10-12 09:50 上傳
發(fā)酵豆粕指利用有益微生物發(fā)酵低值豆粕,去除多種抗營養(yǎng)因子,同時產(chǎn)生微生物蛋白質(zhì),豐富并平衡豆粕中的蛋白質(zhì)營養(yǎng)水平,最終改善豆粕的營養(yǎng)品質(zhì),提高飼料效率。發(fā)酵豆粕含益生菌、酶制劑、肽等功能成分。
生物發(fā)酵法處理生豆粕, 相對物理、化學、作物育種等方法具有成本低、無化學殘留, 應(yīng)用較安全; 對飼料營養(yǎng)成分的影響較小, 且能使營養(yǎng)物質(zhì)更易被動物吸收等優(yōu)點。是目前減少抗營養(yǎng)因子的影響,提高豆粕蛋白質(zhì)的消化利用率的有效方法。發(fā)酵豆粕已成為豆粕開發(fā)生產(chǎn)的熱點。
發(fā)酵工藝
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2013-10-12 09:48 上傳
豆粕發(fā)酵技術(shù)
發(fā)酵方式:固態(tài);復合;聯(lián)合;混菌;多菌
發(fā)酵菌種:霉菌;酵母;細菌
發(fā)酵目的:
?。?)營養(yǎng)目的:降解蛋白質(zhì),增加有益AA和肽類物質(zhì);平衡AA;減少抗營養(yǎng)因子;提高原料利用率
?。?)安全目的:飼料用抗生素替代技術(shù)的物質(zhì)基礎(chǔ)
?。?)安全+營養(yǎng)目的:多功能添加劑——益生菌/復合酶/抗氧化成分/酵母培養(yǎng)物/發(fā)酵混合物/未知生長因子
(4)原料目的:優(yōu)質(zhì)乳豬料蛋白原料/替代魚粉
豆粕發(fā)酵的兩個階段
好氧發(fā)酵:在發(fā)酵前期采用好氧發(fā)酵,促使芽孢桿菌、酵母菌等好氧微生物繁殖生長,同時芽孢桿菌、酵母菌分泌產(chǎn)生大量酶類、維生素等活性產(chǎn)物促進乳酸菌的生長。
厭氧發(fā)酵:后期的厭氧發(fā)酵,促進乳酸菌的增殖,由于乳酸菌屬厭氧菌,在無氧條件下產(chǎn)生大量乳酸。微生物在無氧條件下發(fā)生強制自溶,細胞中的胞內(nèi)酶及其他生物活性成分分泌出來。厭氧發(fā)酵時蛋白酶發(fā)生酶解反應(yīng),并產(chǎn)生香味物質(zhì)。
豆粕發(fā)酵主要功能:
增加腸道內(nèi)不能生存的微生物種群,將動物不能利用的物質(zhì)轉(zhuǎn)化為動物能利用的營養(yǎng)素;
提高抗營養(yǎng)素的處理效率,使原來有限的腸道內(nèi)部處理能力在體外人工條件控制下大幅度提高;
增加微生物源性營養(yǎng)素。
微生物發(fā)酵法是降解豆粕中抗營養(yǎng)因子的主要途徑
發(fā)酵過程微生物的大量繁殖消耗利用非蛋白類抗營養(yǎng)因子(如植酸、低聚糖、致甲狀腺腫素等),
微生物會分泌一些蛋白酶對豆粕中的蛋白類抗營養(yǎng)因子進行降解(如大豆抗原蛋白、胰蛋白酶抑制劑、大豆凝集素、脲酶、脂肪氧化酶)。
影響發(fā)酵豆粕的三個因素
所采用的發(fā)酵劑。就是用來發(fā)酵的微生物菌種。使用不同的微生物發(fā)酵,其代謝功能不同,產(chǎn)品的質(zhì)量也必然有所不同。
發(fā)酵工藝,如淺層發(fā)酵、深層發(fā)酵、批次式發(fā)酵或連續(xù)式發(fā)酵;
發(fā)酵容器(發(fā)酵容器與發(fā)酵工藝相適應(yīng))
發(fā)酵工藝
淺層發(fā)酵: 淺層發(fā)酵的發(fā)酵物料厚度一般在5 cm以下,適用于純好氧發(fā)酵。由于物料的厚度對物料的通氣性能有影響,物料厚度高不利于氧氣的擴散。由于淺層發(fā)酵需要大量發(fā)酵面積,只能采用淺盤架式生產(chǎn),因此,難以機械化生產(chǎn),大多數(shù)采用手工操作。
深層發(fā)酵: 深層發(fā)酵的物料一般在3Ocm以上,有的高達100 cm以上,主要適用前期好氧、中后期兼性厭氧發(fā)酵,因此適用于復合菌種、曲種發(fā)酵。
發(fā)酵豆粕各項指標檢測方法與標準
1、水份、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、灰份、鈣和磷的分析方法全部采用國標法。
2、總有機酸測定采用氫氧化鈉滴定的方法和乳酸測定采用氣象色譜。
3、pH的測定采用玻璃電極pHS-3C型pH計測定。
4、可溶蛋白的測定方法
5、小肽含量的測定
水份的測定
水份測定直接參見國標
測定完水分后的樣品需要測定其中的總有機酸的含量,其數(shù)值為A,并計算有機酸的揮發(fā)量。
水份含量的計算時應(yīng)當扣除這部分有機酸的揮發(fā)量,否則會出現(xiàn)水分超標現(xiàn)象。
總有機酸檢測
試劑:NaOH標準溶液(鄰苯二甲酸氫鉀標定),酚酞指示劑
儀器:磁力攪拌器 離心機
方法:
?。?)取發(fā)酵后鮮樣品15g 置于150ml燒杯中加入溶于100ml去離子水,在磁力攪拌器上浸提30min。
(2)取部分浸提樣離心10min(3000r/min)。
?。?)取上清液15ml, 加30ml去離子水稀釋(以消除底色的影響),加酚酞指示劑四滴,用0.1molNaOH標準溶液滴定,并記錄到終點消耗NaOH體積。(終點到溶液呈現(xiàn)粉紅)
計算
乳酸(%)=N(NaOH)×V(NaOH) ×0.09008/15×115/15g
N(NaOH):NaOH標準溶液的濃度;
V(NaOH) :消耗NaOH標準溶液體積;
0.09008:乳酸的毫克當量。
0.1mol氫氧化鈉的配制與標定
1、配制:稱取9.6g氫氧化鈉,溶于100ml水中,搖勻,注入聚乙烯容器中,密閉放置至溶液清亮。用塑料管虹吸5ml的上清液,注入2000ml無二氧化碳水中(將去離子水煮沸5分后冷卻),搖勻。
2、標定
稱取0.67g于105~110℃烘至恒重的基準的鄰苯二甲酸氫鉀,準確至0.0001g,溶于50ml的無二氧化碳水中,加4滴酚酞指示劑(0.1%),用配制好的氫氧化鈉溶液滴定至溶液呈粉紅色,同時作空白試驗。
3、計算
氫氧化鈉標準溶液的濃度按下式計算
c(NaOH)=m/(V1-V2)×0.2042
式中 c(NaOH)--氫氧化鈉標準溶液之物質(zhì)的量的濃度,mol/l;
V1--滴定用鄰苯二甲酸氫鉀之用量,ml;
V0--空白試驗氫氧化鈉溶液之用量,ml;
m--鄰苯二甲氫鉀之質(zhì)量,g;
0.2042--與1.00ml氫氧化鈉標準液[c(NaOH)=1.000mol/l]相當?shù)囊钥吮硎镜泥彵蕉讱溻浿昧俊?br />
0.1%酚酞指示劑的配制:稱取1.000克酚酞,溶解與100ml95%的試劑酒精中,混勻即得。
乳酸測定
稱取樣品10g與50ml的燒杯中,移取30ml去離子水,在磁力攪拌器上攪拌30min,在3000r/min離心10min,取上清液利用氣相色譜或液相色譜測定乳酸含量。
pH的測定
稱取樣品10g與50ml的燒杯中,移取15ml去離子水,攪拌30min,用 pHS-3C型pH計測定溶液的pH值?;蛘哂镁躳H試紙測試。
可溶性蛋白的測定
根據(jù)AOCSBa11-65測定蛋白質(zhì)溶解指數(shù)的方法
稱取20g樣品于300ml的勻漿杯中、量取50ml 37+1℃的去離子水于勻漿杯中,將勻漿杯放在37℃的水浴中,浸泡攪拌5min,在內(nèi)切式組織勻漿機上勻漿10min,從勻漿杯中取出漿液移入600ml燒杯中,待漿液分層后,移出40ml上清液注入50ml離心管中,并在2700r/min的轉(zhuǎn)速下離心10min,移取15ml上清液于凱氏燒瓶中,測定上清液中蛋白質(zhì)含量和樣品總蛋白含量,計算溶解可溶性蛋白質(zhì)的數(shù)量。
小肽含量測定方法
三氯乙酸(TCA)法
三氯乙酸法的原理是利用大分子的蛋白質(zhì)在TCA溶液中沉淀,除去酸不溶蛋白質(zhì),然后測定酸溶蛋白含量。國外大量資料表明在蛋白質(zhì)酶水解的研究中測定水解度,通常在酶解液中加入TCA溶液,是為水解的大分子蛋白質(zhì)沉淀,而與小分子的酸溶蛋白成分,即肽類和FAA離開,測定酸溶蛋白占總蛋白的含量,求得水解度,即酸溶蛋白占總蛋白的百分比。
粗蛋白≥50% 小肽(1000d以下)≥10%
乳酸≥3.5% 水分≤10%
鈣 0.5-0.54% 總磷≥0.74%
/gm益生菌≥20億/克 蛋白酶≥150
粗脂肪≤5.0% 粗纖維≤3.0%
無氮浸出物≤28% 粗灰分≤6.0%
豬消化能(kcal/kg)3980
豬代謝能(kcal/kg)3600
豬凈能(kcal/kg)2320
禽代謝能(kcal/kg)2570
魚消化能(kcal/kg)3200
奶牛凈能(kcal/kg)1090
項目
含量
天門冬氨酸Asp 5.42%
賴氨酸Lys 3.03%
蛋氨酸Met 0.65%
蘇氨酸Thr 2.05%
精氨酸Arg 3.50%
甘氨酸Gly 2.25%
絲氨酸Ser 2.43%
異亮氨酸Ile 2.21%
苯丙氨酸Phe 2.37%
纈氨酸Val 2.36%
組氨酸His 1.24%
谷氨酸Glu 9.84%
丙氨酸Ala 2.30%
脯氨酸Pro 2.04%
色氨酸Trp 0.50%
亮氨酸Leu 3.76%
發(fā)酵豆粕與普通豆粕、膨化豆粕比較
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